四、血清Lp(α)测定法

1.原理 血浆(清)中脂蛋白(α)(Lp(α))与Lp(α)的单克隆抗体(鼠)结合形成抗原抗体免疫复合物,有浊度改变,测定溶液界质中混浊度的光密度改变,求其血浆中Lp(α)的含量。 Lp(α)+抗人Lp(α)→抗原抗体复合物→测定光密度 2.试剂与仪器 试剂(第一化学);Lp(α)缓冲液(R1);Lp(α)抗体液(R2)。 仪器:生化分析仪(以CL-7200型为例) 3.操作方法 [img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/dongmaizhouyangyinghua/dongmaizhouyangyinghua119.jpg[alt][/alt][/img] 以△A=A[XB]2[/XB]-A[XB]1[/XB]进行运算Lp(α)浓度。 4.定标: 取Lp(α)定值液,用0.9%NaCl液稀释。 采用上述操作步骤,按免疫测定法定标,其操作方法及标准曲线如图16-3所示。 [img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/dongmaizhouyangyinghua/dongmaizhouyangyinghua120.jpg[alt]Lp(α)免疫测定法的反应过程光密度变化值mAbs(A)及其检测的标准曲线图[/alt][/img] 图16-3 Lp(α)免疫测定法的反应过程光密度变化值mAbs(A)及其检测的标准曲线图(B)(CL-7200型) 上机参数(以CL-72OO型为例)
名称LPA名称LPA

测定方法Endpoint标准(1)0.72

标本量16μl标准(2)1.44

R[XB]1[/XB]试剂量280μl标准(3)2.88

R[XB]2[/XB]试剂量40μl标准(4)5.75

反应时间第一波长5min标准(5)11.5
第二波长4.99min波长1.2[340][750] 
5.注意事项: (1)操作时,标本和试剂无需处理; (2)血浆或血清标本均可检测。标本置2~21℃保存1周不变; (3)标本浓度超过定标最高值时,应用生理水稀释后再测; (4)抗体试剂(R[XB]1[/XB])避免反复接触; (5)测定时避免日光直接照射。