五、脂蛋白x的电泳分析

1．原理 血清脂蛋白x的组成中磷脂占66%，蛋白质仅占6%，在电场中因电荷少，选择电渗大小合适的琼脂为电泳支持物，则LpX向阴极移动，而其他蛋白质向阴极移动，从而达到分离的目的。用免疫沉淀法或聚阴离子沉淀法使其在琼脂板上沉淀，对于LpX阳性的血清可以在加样孔的阴极端见到白色沉淀带。 2、试剂 巴比妥缓冲液500mmol/L：pH8.6,离子强度0.05。 1%琼脂用上述巴比妥缓冲液加热配制。 沉淀剂；每升中含MgCl[XB]2[/XB]0.1mol，肝素2.5g及MaCl9g。 3．仪器：电泳仪。 4．操作： （1）制板 1%琼脂糖加热未冷却前于一洁净载玻片上均匀铺开。凝固后在一端2cm～3cm处打孔（直径约2.5mm）。 （2）电泳　将血清20μl加于小孔内（勿使外溢和有气泡）。按琼脂糖脂蛋白电泳操作、搭桥、通电1mA、40min。 （3）浆琼脂玻片浸在沉淀剂中30min后观察结果（如Lp-x阳性，数min内即出现沉淀线），Lp-x浓度到3.3mg/dl上即可出现阳性反应。 正常值：正常人血清无Lp-x带。 （储建中　吴翠华）