三、高密度脂蛋白亚组份胆固醇（HDL2-C，HDL3-C）检测

[b]聚乙二醇20000沉淀法[/b] 1．原理： HDL中主要组份为HDL[XB]2[/XB]和HDL[XB]3[/XB]。用聚乙二醇20000（PEG20000）作沉淀剂，以不同浓度在不同pH条件下，可将HDL[XB]2[/XB]和HDL[XB]3[/XB]分离开。95g/L聚乙二醇20000在pH6.5环境下可将血清中低密度脂蛋白（LDL）和极低密度脂蛋白（VLDL）沉淀，离心后上清液中只含HDL。170g/L聚乙二醇20000在pH7.5环境中，可将LDL、VLDL、HDL[XB]2[/XB]沉淀，离心后上清液中只含HDL[XB]3[/XB]，以酶试剂侧定各自上清液中胆固醇含量，通过换算，计算出代表HDL各亚组分含量。 2．试剂：沉淀剂Ⅰ：95g/L PEG20000，pH6.5 沉淀剂Ⅱ：170g/LPEG20000，pH7.5。 胆固醇酶应用液及参考血清以试剂盒而定。 3．操作方法：（以生化分析仪为例）按表16-3操作 表16-3 HDL-C亚组分测定操作步骤

加入物	1管	2管
血清	100	100
沉淀剂Ⅰ（μl）	200	-
沉淀剂Ⅱ（μl）	-	200

置混匀器上混匀2min，置室温10min，3000r/min离心20min，上清液待测。 上清液于生化分析仪测定，测定参数参照总固醇测定法。 5．结果计算 HDL-C=上机测得结果×血清稀释倍数 HDL[XB]3[/XB]-C=上机测得结果×血清稀释倍数 HDL[XB]2[/XB]-C=HDL-C×HDL3 6．注意事项： 离心时间及速度一定要准确； 离心上清液混浊者应继续离心直到清亮止；