二、血清低密度脂蛋白测定
LDL是一组不均一的脂蛋白颗粒，其胆固醇含量约占总胆固醇的45%～50%。
测定血浆中LDL，首先同样要分离LDL，其分离方法有超速离心法、聚阴离子沉淀法、色谱法、电泳法及计算法等。以聚阴离子沉淀法简便易于操作，结果准确可靠。由于直接测定LDL有一定的困难，因为它是蛋白质脂类组成的颗状结构，胆固醇是其较为衡定的因素，因此采用测定LDL中所含的胆固醇的浓度作为LDL定量的依据。
另外，还可以通过用Friedwal公式计算，主要是利用血清TC、TG及HDL-C浓度测定结果，即LDL-C=TC-HDL-C-（1/5）TG。对脂代谢异常的高脂血症，不能按此方法计算结果。
[b]（一）聚乙烯硫酸盐（PVS）法[/b]
1．原理
[img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/dongmaizhouyangyinghua/dongmaizhouyangyinghua116.jpg[alt][/alt][/img]生成的醌亚胺与上清液的TC含量成正比。
2．试剂组成
（1）沉淀剂：聚乙烯硫酸钾盐0.7g/L、聚乙二醇独甲醚170g/L、乙二胺四乙酸5mmol/L，混匀，4～21℃避光可保存一年。
（2）酶法胆固醇测定试剂（同第15章）。
（3）胆固醇标准液：2.58mmol/L。
3．操作
（1）空腹12h，采静脉血，3h内分离完成血清以免脂蛋白之间相互交换和防止LDL降解。-70℃可以保存数月之久。
（2）取200μl血清置于含有沉淀剂100μl试管中充分混匀，室温放置15min,3000r/min离心，留上清测定胆固醇。
（3）按下表进行操作：
| | 空白管 | 测定管 | 标准管 |
| 上清液（μl） | | 30 | |
| 定值血清（μl） | | | 30 |
| 水（μl） | 30 | | |
| 胆固醇酶试剂（μl） | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
混匀，37℃6min，以空白管调零（500nm），读取光密度。
（4）计算
[img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/dongmaizhouyangyinghua/dongmaizhouyangyinghua117.jpg[alt][/alt][/img]
血清LDL-C=TC-上清液胆固醇
（5）注意事项
标本沉淀过程严格按要求进行。吸取上清液时，注意轻吸，别搅动沉淀。
PVS法能将Lp（α）完全沉淀，一般情况下，正常人含量极少，一旦高脂血症、Lp（α）增高时，其测定值LDL-C应为LDL-C和Lp（α）-C之和。
[b]（二）血清LDL-C直接测定法[/b]
1．原理
含反应活性剂的试剂Ⅰ加入血清后，与HDL、VLDL和CM反应，使其胆固醇水解并与酶反应生成无色产物溶于介质中。再加入含溶解LDL的活性剂Ⅱ试剂，使LDL水解并与其中的胆固醇试剂进行偶联反应生成红色化合物，定量血清中LDL-C。
[img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/dongmaizhouyangyinghua/dongmaizhouyangyinghua118.jpg[alt][/alt][/img]以△A=A[XB]2[/XB]-A[XB]1[/XB]进行运算，测出LDL-C的含量
2．试剂（第一化学）
R1：去垢剂1、COD、POD、4-AAP。
R2：去垢剂2、DSBmT。
3．操作
按CL-7200型或其他型号全自动生化分析仪检测，有关参数如表16-2所示。
表16-2 LDL-C检测参数
| 名称 | 参数 |
| 分析方式 | 终点法 |
| 标本用量（μl） | [3] |
| R1体积（μl） | [300] |
| R2体积（μl） | [100] |
| 第一试剂时间 | 5min |
| 第二试剂时间 | 5min |
| 波长（nm） | [560][600] |
4．特点
（1）直接测定，无需预先处理。
（2）操作简便，减少影响准确性的因素。
（3）标本及试剂用量少，准确性高。
（4）抗干扰能力强，适合于自动化分析。
（5）该法CV为5%以下，回收率90%～110%，线性范围0～88mmol/L。
5．注意事项
待测血清标本于当日测试，2～8℃一周内保存，-20℃以下长期保存，结果均不受影响。
