五、无脂蛋白血清的制备

1.用途:无脂蛋白血清(lipoprotein deficient serum,LPDS)主要用于LDL受体活性测定的细胞培养。 2.操作:常规采血,室温放置1~2h,以3kr/min离心10min,分离得到血清。向血清中按每1ml加0.33496g KBr,使其血清密度为d=1.215,或者按等体积加d=1.215的KBr液,按前述两方法铺在血清上面,按40kr/min(100k×g)速度,离心40h。离心完毕,将淡黄色上层脂蛋白与无色的中间层除去,下层液上再铺d=1.215溶液,重复上述离心操作。将下层液,对0.15mol/l NaCl,0.3mmol/L EDTA(pH8.0) 溶液透析,用过滤器除菌,尔后分成小包装贮存在-20℃备用。 六、其他方法 除上述介绍的常用方法外,还有凝胶过滤和高压液相层析法分离血浆脂蛋白的方法,有关参考书很多,在此不一一介绍。