四、硫酸右旋糖苷（DS）沉淀血清脂蛋白法

[b]1．试剂[/b] 1%DS、10%DS、2mol/L CaCl[XB]2[/XB]、1mol/L K[XB]2[/XB]C[XB]2[/XB]O[XB]4[/XB]、12%NaCl、0.2mol/l Tris-HCl、0.9%NaCl、0.01mol/L EDTA(pH7.4) [b]2.操作[/b] 混合血清在3000r/min下，离心30min，除去血细胞及其他固体物质，再以2000r/min离心30min（4℃），以除去血清中的CM。 取一定体积的上述血清，加1%DS，使血清中的DS浓度为0.05%，加2mol/lCaCl[XB]2[/XB]，使血清中CaCl[XB]2[/XB]的终浓度为0.1mol/L，搅拌后放4℃冰箱过夜，于第二天离心（3750r/min）30min，将离心后的沉淀物溶解在12%NaCl中，而后加0.2mol/l Tris-HCl缓冲液250ml（pH7.4），离心10min,弃去上清，将所得沉淀用0.02mol/l Tris-HCl再洗一次，此步骤要重复3次。将最后得到的VLDL和LDL溶解在7.5～15ml的1mol/L草酸钾中（4℃），3750r/min离心30分钟，去掉沉淀，然后将此溶液在1%NaCl，1%BaCl[XB]2[/XB]溶液中透析48h（4℃）。将透析过的溶液放于离心管中去掉沉淀。把上清液再放入0.02mol/l Tris-HCl缓冲液透析72h，离心，其上清则含有较纯的VLDL和LDL