三、从血浆直接分离LDL

用EDTA抗凝血，离心得血浆，可采用大容量（300ml）超离管进行。血浆容量依次要加定量的KBr（Xg），可按下述公式计算： [img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/dongmaizhouyangyinghua/dongmaizhouyangyinghua112.jpg[alt][/alt][/img] V为血浆容量（ml）数，d[XB]1[/XB]、d[XB]2[/XB]分别为该配制的最初的两种溶液密度，υ为调节密度用的KBr的目的试剂水密度的偏比容。血浆d=1.006。首先调节溶液密度到d[XB]2[/XB]=1.019，离心除去。VLDL，d[XB]2[/XB]=1.019的υ为0.2922，即1ml血浆中应当加KBr0.01851g，溶解后，每管注入约16ml将d=1.019溶液8ml（0.5体积）覆盖其上，40kr/min，18℃，离心16h，再除去黄色层以上的上层界面液，测量下层黄色层液ml数，再按上式计算添加0.0644g/mlKBr，以成d=1.063的溶液（υ=0.2982）同样每管（16ml）加8ml的d=1.063溶液覆盖其上，40kr/min，18℃，离心16h，取上层黄色区带，并对0.15mol/lNaCl,0.3mmol/L EDTA(pH8.0)充分透析，该黄色脂蛋白即LDL，可用作LDL受体的配体。 添加KBr量计算式中的偏比溶（υ），d=1.019、1.063、1.125、1.210、1.215的值相应为0.2922、0.2982、0.3035、0.3090、0.3093。