二、IL-2的检测

IL-2的检测方法主要有两大类，一类是细胞增殖法，另一类是免疫学检测法。 [b]（一）细胞增殖法[/b] IL-2可刺激某些淋巴细胞增殖，根据细胞增殖情况可反映IL-2的活性，结果以U/ml表示。目前所用的IL-2反应细胞主要有CTLL、CTB6、F12、CTLL-2等小鼠IL-2依赖细胞株以及ConA活化的小鼠淋巴母细胞和小鼠胸腺细胞。这类细胞的增殖情况均可通过显微镜下直接计数、[SB]3[/SB]H-TdR掺入法以及MTT法加以测定。 1．依赖性细胞株增殖法IL-2依赖细胞株在IL-2存在时才能生长，而对PHA、ConA等促有丝分裂原及IL-2以外的其它细胞因子均无反应。CTLL-2对IL-2的依赖性最强，表现为在单独培养时[SB]3[/SB]H-TdR的掺入量低，而在IL-2存在时掺入值高，故为首选的靶细胞株。 2．T淋巴母细胞增殖法T细胞经植物血凝素激发转化为T淋巴母细胞，并表达丰富的IL-2受体，在体外IL-2存在时持续增殖，并与IL-2含量呈剂量依赖关系。 3．胸腺细胞增殖法IL-2可以增另ConA的促有丝分裂原作用而引起T血细胞大量增殖。将一定数量的小鼠胸腺细胞与亚刺激量的ConA和不同稀释的待检标本共育，在一定时间后检测IL-2增殖情况即能代表IL-2的活性。胸腺细胞增殖试验是目前检测IL-2活性最简便的方法。此法缺点是敏感性较差，如待测标本中存留有ConA会出现较强的非特异性反应等。 [b]（二）免疫学检测法[/b] 根据抗原－抗体反应的原理，可利用抗IL-2的单克隆或多克隆抗体直接测定样品中的IL-2含量，结果用ng/ml表示。本法在rIL-2生产制备过程中可用以跟踪检测，在rIL-2基因克隆时亦可对阳性质粒进行初步筛选。