费休(K.Fischer)氏水分测定法

[b]1 试剂[/b] 1.1 无水吡啶 取吡啶200ml,置干燥的蒸馏瓶中,加苯40ml,加热蒸馏,收集114~116℃蒸馏出的吡啶,含水量应在0.1%以下。 1.2 无水甲醇 取甲醇1000ml,于干燥蒸馏瓶中,加金属镁约15g与二氯化汞0.4g(或碘0.5g)回流2~4小时,然后蒸馏(蒸馏仪器均需干燥),收集64~65℃蒸馏出的甲醇,含水量应在0.05%以下。 1.3 二氧化硫 工业用,如无二氧化硫可用硫酸及亚硫酸钠配制。 Na2SO3+H2SO4→Na2SO4+H2SO3 H2SO3→H2O+SO2 按此反应根据SO2之需要量计算亚硫酸钠及硫酸之用量,将亚硫酸钠置于瓶中,加少量水,缓缓加入硫酸,将生成之二氧化硫通过浓硫酸洗气瓶,再通入费休氏试剂瓶中。 1.4 费休氏试剂 取干燥的1000ml玻璃容器,加入碘42.33g与无水吡啶133.3ml,加塞,振摇至碘全部溶解后,加无水甲醇333.3ml,称定重量,将此瓶置冰浴中,用密闭装置导入经浓硫酸洗气瓶脱水的二氧化硫直至重量增加32g为止,密封避光保存。 1.5 标准水的制备与标化 1.5.1 制备 于干燥无水的50ml容量瓶中,精密称取0.4g左右双蒸水,用无水甲醇稀释至刻度,密封保存。 1.5.2 标化 精密量取标准水1ml与制备标准水用的无水甲醇5ml分别置于干燥带塞的玻瓶中,用费休氏试剂滴定至溶液呈棕黄色。 1.5.3 计算 称取水重为Amg。 1ml标准水所需费休氏试剂为Bml。 5ml无水甲醇所需费休氏试剂为Cml。 每ml费休氏试剂相当于水的mg数为N=A/50 / B-C/5 1ml标准水之含水量(mg)=N×B [b]2 操作[/b] 2.1 精密称取干燥制品0.1~0.5g于干燥带塞的玻瓶中,加无水甲醇5ml(按取样量情况可酌情减少甲醇加量),不断振摇,用费休氏试剂滴定至棕黄色,经振摇1分钟不退色,即为终点。同时取无水甲醇5ml作空白试验。 2.2 费休氏试剂标化 精密量取标准水1ml于干燥带塞的玻瓶中,用费休氏试剂滴定至终点。 1ml标准水含水量(mg) 费休氏试剂效价N= ──────────── 费休氏试剂滴定数 [b]3 计算[/b] (样品滴定数-空白滴定数)×N1 样品水分含量%(g/g)= ────────────────×── 样品重量 10 [b]附注[/b] 1.配制试剂及测定样品用的全部仪器均应干燥至无水。 2.布氏菌病活菌苗及鼠疫活菌苗等制品能在费休氏试剂中溶解,可不用加无水甲醇提取。 3.空气中湿度大,对水分测定有影响,取样时应备有防湿装置。相对湿度应30%以下。 4.有条件可采用卡氏水分测定仪测定。 5.如样品中含有干扰物质,可采用五氧化二磷真空低温干燥法测定。 5.1 试剂 五氧化二磷(工业用)。 5.2 操作 取制品0.2~1.0g置于已干燥至恒重的称量瓶中,加盖,精确称定重量(称量瓶中样品厚度应在5mm以下),放入五氧化二磷干燥器中,打开瓶盖,于60℃将干燥器抽真空至133Pa以下,干燥至恒重。干燥完毕应缓慢通入经浓硫酸脱水的干燥空气。 5.3 计算 样品水分含量%(g/g)=干燥失重/样品重量×100