费休（K.Fischer）氏水分测定法

[b]1　试剂[/b] 1.1　无水吡啶 取吡啶200ml，置干燥的蒸馏瓶中，加苯40ml，加热蒸馏，收集114～116℃蒸馏出的吡啶，含水量应在0.1%以下。 1.2　无水甲醇 取甲醇1000ml，于干燥蒸馏瓶中，加金属镁约15g与二氯化汞0.4g（或碘0.5g）回流2～4小时，然后蒸馏（蒸馏仪器均需干燥），收集64～65℃蒸馏出的甲醇，含水量应在0.05%以下。 1.3　二氧化硫 工业用，如无二氧化硫可用硫酸及亚硫酸钠配制。 Na2SO3+H2SO4→Na2SO4+H2SO3 H2SO3→H2O+SO2 按此反应根据SO2之需要量计算亚硫酸钠及硫酸之用量，将亚硫酸钠置于瓶中，加少量水，缓缓加入硫酸，将生成之二氧化硫通过浓硫酸洗气瓶，再通入费休氏试剂瓶中。 1.4　费休氏试剂 取干燥的1000ml玻璃容器，加入碘42.33g与无水吡啶133.3ml，加塞，振摇至碘全部溶解后，加无水甲醇333.3ml，称定重量，将此瓶置冰浴中，用密闭装置导入经浓硫酸洗气瓶脱水的二氧化硫直至重量增加32g为止，密封避光保存。 1.5　标准水的制备与标化 1.5.1　制备 于干燥无水的50ml容量瓶中，精密称取0.4g左右双蒸水，用无水甲醇稀释至刻度，密封保存。 1.5.2　标化 精密量取标准水1ml与制备标准水用的无水甲醇5ml分别置于干燥带塞的玻瓶中，用费休氏试剂滴定至溶液呈棕黄色。 1.5.3　计算 称取水重为Amg。 1ml标准水所需费休氏试剂为Bml。 5ml无水甲醇所需费休氏试剂为Cml。 每ml费休氏试剂相当于水的mg数为N=A/50　/　B-C/5 1ml标准水之含水量（mg）=N×B [b]2　操作[/b] 2.1　精密称取干燥制品0.1～0.5g于干燥带塞的玻瓶中，加无水甲醇5ml（按取样量情况可酌情减少甲醇加量），不断振摇，用费休氏试剂滴定至棕黄色，经振摇1分钟不退色，即为终点。同时取无水甲醇5ml作空白试验。 2.2　费休氏试剂标化 精密量取标准水1ml于干燥带塞的玻瓶中，用费休氏试剂滴定至终点。 1ml标准水含水量（mg） 费休氏试剂效价N=　──────────── 费休氏试剂滴定数 [b]3　计算[/b] （样品滴定数-空白滴定数）×N1 样品水分含量%（g/g）=　────────────────×── 样品重量　10 [b]附注[/b] 1．配制试剂及测定样品用的全部仪器均应干燥至无水。 2．布氏菌病活菌苗及鼠疫活菌苗等制品能在费休氏试剂中溶解，可不用加无水甲醇提取。 3．空气中湿度大，对水分测定有影响，取样时应备有防湿装置。相对湿度应30%以下。 4．有条件可采用卡氏水分测定仪测定。 5．如样品中含有干扰物质，可采用五氧化二磷真空低温干燥法测定。 5.1　试剂 五氧化二磷（工业用）。 5.2　操作 取制品0.2～1.0g置于已干燥至恒重的称量瓶中，加盖，精确称定重量（称量瓶中样品厚度应在5mm以下），放入五氧化二磷干燥器中，打开瓶盖，于60℃将干燥器抽真空至133Pa以下，干燥至恒重。干燥完毕应缓慢通入经浓硫酸脱水的干燥空气。 5．3　计算 样品水分含量%（g/g）=干燥失重/样品重量×100