第四节 非酯化脂肪酸测定
临床上将C[XB]10[/XB]以上的脂肪酸称为游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)或非酯化脂肪酸(nonesterifiedfatty acid,NFFA),正常血清中含有油酸(18:1,W[SB]9[/SB])占54%,软脂酸(16:0)占34%,硬脂酸(18:0)占6%,是其主要的NFFA。另外还有月桂酸(12:0)、肉豆蔻酸(14:0)和花生四烯酸(20:4,W[SB]6[/SB][SB],9,12,15[/SB])等含量很少的脂肪酸。与其他脂质比较,NFFA在血中浓度很低,其含量水平极易受脂代谢,糖代谢和内分泌机能等因素影响,血中NFFA半寿期为1~2min,极短。血清中的NFFA是与清蛋白结合进行运输,属于一种极简单的脂蛋白。
测定血清NFFA法有滴定法。比色法,原子分光光度法,高压液相层析法和酶法等。一般多以酶法测定。作NFFA测定的标本一定要注意在4℃条件下分离血清并尽快进行测定。因为血中有各种脂肪酶存在,极易也极快使血中TG和PL的酯型脂肪酸分解成非酯化的FFA,使血中NFFA值上升。贮存标本仅限于24h内,若保存三天,其值约升高30%,使结果不准确。
1.非酶法测定
非酶法测定包括滴定法、比色法、原子吸收分光光度法和高压液相层析法。前三种方法准确性差;高压液相层析法,仪器太昂贵,不便于批量操作。
2.酶测定法
主要用脂肪酶测定。血清中游离脂肪酸可分别测定酶水解后的产物乙酰CoA或AMP或辅酶A(CoA)进行定量。酶法测定结果准确可靠,快速,易于批量检测。测定原理如图15-6所示。
[img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/dongmaizhouyangyinghua/dongmaizhouyangyinghua106.jpg[alt]血清主要FFA酶法测定图[/alt][/img]
图15-6 血清主要FFA酶法测定图
□:内物质作为生成量与变化量进行测定;ACS:乙酰CoA合成酶;MK:肌激酶; PK:丙酮酸激酶;POD:丙酮酸氧化酶;DTNB:α-磺基苯甲酸;ACO:乙酰CoA氧化酶;ACD:乙酰CoA脱氢酶。