二、酶法

1．原理 磷脂酶D因特异性不高，能水解血清中卵磷脂，溶血卵磷脂和神经磷脂（三者占血清总磷脂的95%），释放出胆碱，胆碱在胆碱氧化酶作用下生成甜菜碱和H[XB]2[/XB]O[XB]2[/XB]，在过氧化物酶作用下，H[XB]2[/XB]O[XB]2[/XB]，4-氨基安替比林、酚发生反应生成红色醌亚胺化合物，其颜色深浅与这三种磷脂的含量成正比，在500nm波长下比色计算结果为： 2．试剂 （1）酶应用液（参考配方）：每100mlTris-His缓冲液（50mmol/L，pH7.8）中含：

磷脂酶D	45U
胆碱氧化酶	100U
过氧化物酶	220U
4-氨基安替比林	12mg
酚	20mg
CaCl[XB]2[/XB]·2H[XB]2[/XB]O	8mg
TritonX-100	0.2g

(2)标准液：纯卵磷脂，临用前配制，5mg/2.5ml蒸馏水（含TritonX-1000.5%） 3．操作 （1）标本采集：空腹12h抽静脉血，不抗凝，分离血清或抗凝血分离血浆。 （2）在3.0ml酶应用液中加入血清（浆）20μl，标准管加标准液20μl，空白管加水20μl，放置37℃水浴10min后，波长500nm，比色，空白管液调零。 4．计算 血清磷脂（mg/dl）=TA/SA×200 血清磷脂（mmol/L）=血清磷脂（mg/dl）×0.01292