二、酶法（GK-GPO-POD比色法）

血清中甘油三酯经脂肪酶水解为甘油和脂肪酸，甘油在甘油激酶（GK）及ATP存在下，生成3-磷酸甘油，尔后，在磷酸甘油氧化酶（GPO）作用氧化成磷酸二羟丙酮并生成H[XB]2[/XB]O[XB]2[/XB]，H[XB]2[/XB]O[XB]2[/XB]与底物4-氨基安替比林和ESPAS在过氧化物酶（POD）作用下，生成红色亚醌化合物（quinoneimine），比色（500nm），其颜色深浅与甘油三酯含量成正比。 [img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/dongmaizhouyangyinghua/dongmaizhouyangyinghua102.jpg[alt][/alt][/img] [b]（一）手工测定法[/b] 1．试剂组成

代号	种类	浓度	贮存2～8℃
R1	磷酸甘油氧化酶	≥3.0KU/L	冷藏
（A液）	抗坏血酸氧化酶	≥1.0KU/L
	甘油激酶	≥0.7KU/L
	4-氨基安替比林	80mg/L
R2	脂蛋白脂酶	≥2.0KU/L	冷藏
	过氧化物酶	≥10KU/L
	ESPAS	300mg/L
R3（参考液）	甘油酸三脂	200mg/dl（2.26mmol/L）	冷藏

*：一般采用商品试剂盒 [img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/dongmaizhouyangyinghua/dongmaizhouyangyinghua103.jpg[alt]血清甘油三酯测定法（酶法）操作图[/alt][/img] 图15-4 血清甘油三酯测定法（酶法）操作图 2．操作 按图15-4操作。 3．计算 血清TG浓度=E[XB]SA[/XB]/E[XB]ST[/XB]×2.26(mmol/L) [b]（二）生化分析仪检测[/b] 全自动生化分析仪测定操作（以CL-7200型为例）。 1．试剂 A液：GK，GPO，4-AA-P、抗坏血酸氧化酶等。 B液：POD，Lipase,ESPAS等。 标准液：甘油三油酸酯 200mg/dl(2.26mmol/L)。 2．上机参数

名称	参数
方法	终点法
波长	双波长（540nm 700nm）
试剂A反应时间	2～3min
试剂B反应时间	5～6min
反应温度	37℃
样本用量	4μl
试剂A用量	200μl
试剂B用量	100μl
单位	mmol/L

3．操作过程 [img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/dongmaizhouyangyinghua/dongmaizhouyangyinghua104.jpg[alt]生化分析仪检测操作过程[/alt][/img] 4．计算 以△A=A2-A1并根据同样之标准或质控物计算，自动打印结果。 5．注意事项 ①试剂与样本量可根据分析仪要求按比例改变。 ②试剂在有效期内2～8℃避光保存。 ③样本中甘油三酯含量超过11mmol/L需用生理盐水稀释后再测。