一、Abell-Kendall改良法

1.原理 血清加入醇溶性氢氧化钾,使胆固醇从脂蛋白中分离出来,同时使胆固醇酯加水分解成游离胆固醇,加石油醚振摇、抽提,使胆固醇移入石油醚层,分离并取一定量的石油醚层,蒸发至干,再进行Liebermann-Burchard 显色反应,620nm比色定量。该法可用于基本功训练及组织细胞胆固醇的提取定量。 2.试剂组成
代号种类浓度组 成贮存2~8℃有效时间
R1乙醇 优质纯  
R2石油醚 沸点68℃,特级纯  
R3水醋酸 分析纯  
R4无水醋酸 胆固醇分析用,不含HCI  
R5浓硫酸 分析纯  
R6KOH液33%(W/W)KOH10g+H[XB]2[/XB]O[XB][/XB]20ml  
R7乙醇性KOH液 R194ml+R66ml 临用前配制
R8Liebermann   配制后
 Burchard R420体积+R51体积+R310体积 1h
 试剂*   内用完
R9胆固醇标准液5.17mmol/L胆固醇标准品200mg+R1→100ml0 
*:在三角烧瓶内,加入无水醋酸,于冰水中冷至10℃以下,再慢慢加入浓硫酸,混合,静置10min,又加冰醋酸混匀,备用。 3.操作 [img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/dongmaizhouyangyinghua/dongmaizhouyangyinghua096.jpg[alt]血清胆固醇(Abell法)测定操作图[/alt][/img] 图15-1 血清胆固醇(Abell法)测定操作图 按图15-1操作。 4.计算 标准总胆固醇浓度=E[XB]SA[/XB]/E[XB]ST[/XB]×5.17(mmol/L)