（三）G-CSF

1.G-CSF的产生　内毒素、TNF-α和IFN-γ可活化单核细胞和巨噬细胞产生粒细胞集落刺激因子（granulocyte colony stimulating factor,G-CSF)。此外，成纤维细胞、内皮细胞、星状细胞和骨髓基质细胞等在LPS、IL-1或TNF-α刺激活化后也可分泌G-CSF。某些白血病细胞以及CHu-2人口腔癌细胞、5637人膀胱癌细胞、MIAPa Ca-2胰腺癌细胞可组成性地表达G-CSF。 2.G-CSF的分子结构和基因　1986年G-CSF cDNA克隆成功，G-CSF基因全长2.5kb，包括5个外显子和4个内含子，人G-CSF基因位于17号染色体，与小鼠G-CSF基因约有73%同源性，与IL-6无论在基因水平以及氨基酸水平上都有很高同源性，包括外显子、内含子组成，Cys数目，两对二硫键位置以及分子的三级结构等。小鼠G-CSF分子共含有208个氨基酸，30个氨基酸先导序列，成熟蛋白为178个氨基酸。人类有两种不同的G-CSf cDNA，分别编码含207和204氨基酸的前体蛋白，均有30个氨基酸的先导序列，成熟蛋白分子分别为177和174个氨基酸，前者除了在成熟分子N端35位处插入了3个氨基酸外，其余的序列与174氨基酸分子相同。人G-CSF分子量为19.6kDa，PI6.1，O-糖基化，对酸碱（pH2～10）、热以及变性剂等相对较稳定。G-CSF有5个半胱氨酸，Cys 36与Cys42，Cys74与Cys64之间形成两对二硫健，Cys17为不配对半胱氨酸，二硫键对于维持G-CSF生物学功能是必须的因素。人和小鼠G-CSF在氨基酸水平有73%同源性，并具有相互交叉的生物学活性。 3.G-CSF受体　1990年G-CSF受体cDNA克隆成功，基因组16.5kb长，有17个外显子。G-CSFR为高亲和力受体，表达在造血祖细胞和中性粒细胞、胎盘细胞、内皮细胞和髓样白血病细胞株如HL-60细胞等，每个中性粒细胞有300～1000个G-CSFR，Kd为100pM。小鼠G-CSFR是高度糖基化的，含812个氨基酸。膜型G-CSFR包括胞膜外区、穿膜区和胞浆区。胞膜外区含有3个区域：（1）N端1个Ig样区；（2）1个红细胞生成素受体超家族结构域，这是识别G-CSF配体的部位；（3）三个串连的Ⅲ型纤维粘连素（fibronectin)结构区。人G-CSF R含813氨基酸，与小鼠G-CSFR有62%同源性。此外，人G-CSFR还有一种759氨基酸的异型（isoform)，这种异型G-CSFR除C端序列不同外，其它部分与前者相同。G-CSFR还可以可溶性形式（sG-CSFR）存在于体液中。 4.G-CSF的生物学作用　G-CSF主要作用于中性粒细胞系（lineage）造血细胞的增殖、分化和活化。在体外G-CSF刺激骨髓造血祖细胞中中性粒细胞集落的形成，延长成熟中性粒细胞的存活时间，活化中性粒细胞，促进其ADCC，超氧阴离子的产生和碱性磷酸酶的合成。最近研究表明，单独G-CSF或与SCF协同可促进多能造血干细胞的增殖、干细胞母细胞集落形成以及体内CFU-S的形成。G-CSF还具有对人粒细胞、单核细胞、成纤维细胞、平滑肌细胞以及成肌纤维细胞的趋化作用。肿瘤患者注射G-CSF后可提高血循环中中性粒细胞的水平，这种作用可能与缩短某些骨髓细胞进入S期的时间以及增加生成粒细胞的祖细胞数量有关。