一、免疫电泳

免疫电泳为区带电泳与免疫双向扩散的结合，是由Grabar和Williams（1953）首先报道的。方法是先利用区带电泳技术将不同电荷和分子量的蛋白抗原在琼脂内分离开，然后与电泳方向平行在两侧开槽，加入抗血清。置室温或37℃使两者扩散，各区带蛋白在相应位置与抗体反应形成弧形沉淀线（图12-8）。根据各蛋白所处的电泳位置，可分为白蛋白区、球蛋白α1区、α2区、β区和γ区。各区带常见血浆蛋白见表12-3和图12-9。 [img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/mianyixuehemianyixuejianyan/mianyixuehemianyixuejianyan055.jpg[alt]免疫电泳扩散模式图A1b：白蛋白[/alt][/img] 图12-8免疫电泳扩散模式图A1b：白蛋白 表12-3血浆免疫电泳各区带所含蛋白成分

ALB	α1	α2	β	γ
白蛋白	α1-抗胰蛋白酶	触珠蛋白	转铁蛋白	IgG
前白蛋白	α1-酸糖蛋白	铜蓝蛋白	C3a、C3b	CRP
α1脂蛋白	抗糜蛋白酶	2-巨球蛋白	IgA、IgM、IgD、纤维蛋白原、β1脂蛋白、血凝素

[img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/mianyixuehemianyixuejianyan/mianyixuehemianyixuejianyan056.jpg[alt]血浆蛋白各区带位置示意图[/alt][/img] 图12-9血浆蛋白各区带位置示意图 PreALB：前白蛋白；HP：触珠蛋白；α[XB]1[/XB]脂蛋白；ALB：白蛋白；TRF：转铁蛋白 βLIP：β脂蛋白；AAT：抗胰蛋白酶；AAG：酸糖蛋白；α[XB]2[/XB]M：α[XB]2[/XB]巨球蛋白 免疫电泳沉淀线的数目和分辨率受许多因素影响。首先是抗原与抗体的比例，同其它沉淀反应一样，要预测抗体与抗原的最适比；其次是抗血清的抗体谱，一只动物的抗血清往往缺乏某些抗体，如将几只动物或几种动物的抗血清混合使用，则效果更好；电泳条件，如缓冲液、琼脂和电泳等皆可直接影响沉淀线的分辨率。对于免疫电泳的分析，更重要的是经验的积累，只有多看，多对比分析，才能作出恰当的结论。 免疫电泳目前大量应用于纯化抗原和抗体成分的分析及正常和异常体液蛋白的识别等方面。