枸橼酸离子含量测定

[b]1 试剂[/b] 1.1 标准枸橼酸钠浓溶液 精确称取枸橼酸钠(Na3C6H标准5O7·2H2O)0.5882g,加蒸馏水溶解,并准确稀释至100ml ,为20mmol/L 枸橼酸钠液。 1.2 标准枸橼酸钠溶液 精密量取标准枸橼酸钠浓溶液5ml,用5%三氯醋酸准确稀释至50ml,为2mmol/L枸橼酸钠标准液。 1.310%三氯醋酸:称取三氯醋酸10g,用蒸馏水稀释至100ml。 1.45%三氯醋酸:称取三氯醋酸5g,用蒸馏水稀释至100ml。 1.5 砒啶(A·R)。 1.6 醋酸酐(A·R)。 [b]2 操作[/b] 2.1 样品 精确量取0.5ml样品,加 4.5ml 蒸馏水,加5ml10%三氯醋酸,混匀,置60℃水浴 5分钟,离心去沉淀。精确量取1ml上清液于25ml玻塞试管中,加1.3ml吡啶,混匀,加5.7ml 醋酸酐,立即混匀并置于31℃水浴,准确培育35分钟后,于 425nm波长下测 OD值,同时做空白试验:取1ml 5%三氯醋酸代替1ml去蛋白后样品上清液,其余操作同样品。 2.2 标准曲线 精确量取标准枸橼酸钠溶液0.0、0.25、0.50、0.75、1.0ml,分别加5%三氯醋酸1.0、0.75、0.5、0.25、0.0ml (其相应的枸橼酸钠离子含量为0、0.5、1.0、1.5、2.0mmol/l ),其余操作从加1.3ml吡啶开始同样品。可得一标准曲线。 [b]3 计算[/b] 由标准曲线查得样品稀释液相当标准枸橼酸离子Ammol/L。 样品枸橼酸离子含量(mmol/L)=A×20