治疗用布氏菌病菌苗制造及检定规程

本品系用弱毒牛型布氏菌经加热杀菌制成。专供治疗亚急性、慢性布氏菌病使用。 [b]1　菌种[/b] 有关菌种的规定及菌种检定按《冻干皮上划痕人用布氏菌病活菌苗制造及检定规程》1.1～1.4项及1.5.1～1.5.5项执行。 [b]2　制造[/b] 2.1　可用肝浸液琼脂或其他适宜培养基制造。 2.2　启开冻干菌种，接种于肝琼脂斜面或其他适宜培养基上，37℃培育44～48小时为第1代菌种。第1代菌种在2～8℃可以保存15日。 2.3　将第1代菌种移种肝琼脂或其他适宜培养基上，放37℃培育44～48小时，为第2代菌种，经肉眼纯菌检查合格后，用灭菌生理盐水洗下菌苔制成悬液。 2.4　用第2代菌悬液接种肝琼脂或其他适宜培养基，放37℃培育44～48小时，肉眼逐瓶检查，有杂菌者废弃。 2.5　用灭菌生理盐水洗下菌苔或刮取菌苔，制成菌液。用绸布袋过滤，合并至灭菌瓶内。 2.6　合并后菌液按中国细菌浊度标准将菌液的浓度调为每ml含150亿～300亿菌，随后放70～80℃水浴摇动1小时杀菌。 2.7　无菌试验 除按《生物制品无菌试验规程》进行外，另接种2管肝琼脂斜面，放37℃培育7天，应无杂菌及本菌生长。 2.8　用灭菌生理盐水将无菌试验合格的菌液稀释为含菌30亿/ml，稀释后应取样做无菌试验，不应有菌生长。 2.9　菌苗内不加防腐剂。稀释菌液分装安瓿后应加热70～80℃1小时。 [b]3　成品检定[/b] 3.1　物理性状检查 菌苗应呈均匀菌悬液，无摇不散的菌块及异物。 3.2　无菌试验 按《生物制品无菌试验规程》进行。 3.3　浓度测定 按中国细菌浊度标准测定。每ml含菌30亿±20%。 3.4　鉴别试验 菌苗应与布氏菌诊断血清发生凝集反应。 3.5　安全试验 每批菌苗用体重18～20g小白鼠5只，每只皮下注射0.5ml，注射后7日内小白鼠不得有死亡。凡有死亡者应复试，仍有死亡者则该批菌苗应废弃。 [b]4　保存与效期[/b] 应保存于2～8℃。自检定合格之日起效期为2年。