二、酶法

1.原理

血清中游离脂肪酸或非酯化脂肪酸(NEFA),经酶试剂作用生成紫色化合物,其颜色深浅与NEFA含量成正比。

[/alt][/img]</p><p>2.试剂组成</p><p><table><tbody><tr><td>代号</td><td>种类</td><td>组成</td><td>浓度贮存</td><td>贮存</td></tr><tr><td>R1</td><td>缓冲液</td><td>磷酸缓冲液<br>  MgCl<sub>2</sub>液<br>  去垢剂</td><td>0.04mmol/LpH6.9<br>  3mol/L</td><td> </td></tr><tr><td>R2</td><td>酶/辅酶</td><td>乙酰CoA合成酶<br>  抗坏血酸氧化酶<br>  CoA<br>ATP<br>4-AAP<br>溶于10ml R1液中</td><td>≥0.3U/ml<br>≥1.5U/ml<br>0.9mmol/L<br>5.0mmol/L<br>1.5mmol/L</td><td>冷藏5日</td></tr><tr><td>R3</td><td>酶稀释液</td><td>苯氧乙醇<br>去垢剂</td><td>0.3%(V/V)</td><td> </td></tr><tr><td>R4</td><td> </td><td>马来酰亚胺<br>该试剂与R3等体积混合</td><td>10.6mmol/L</td><td> </td></tr><tr><td>R5</td><td>酶试剂</td><td>乙酰CoA氧化酶<br>过氧化物酶<br>TOOS<br>混合上述试剂,再等体积R4试剂混合</td><td>≥10U/ml<br>7.5U/ml<br>0.2mmol/L</td><td>冷藏5日</td></tr><tr><td>R6</td><td>标准液</td><td> </td><td>1mmol/L</td><td>冷藏</td></tr></tbody></table></p><p>*应用带玻塞离心管</p><p>3.操作</p><p>按图15-8操作。</p><p>4.计算</p><p>[img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/dongmaizhouyangyinghua/dongmaizhouyangyinghua108.jpg[alt]血清非酯化脂肪酸测定(光度法)操作图

血清非酯化脂肪酸测定(光度法)操作图

图15-7 血清非酯化脂肪酸测定(光度法)操作图

血清非脂化脂肪酸测定(酶法)操作图

图15-8 血清非脂化脂肪酸测定(酶法)操作图

(胡汉宁 储建中)