二、酶法

1.原理 血清中游离脂肪酸或非酯化脂肪酸(NEFA),经酶试剂作用生成紫色化合物,其颜色深浅与NEFA含量成正比。 [img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/dongmaizhouyangyinghua/dongmaizhouyangyinghua107.jpg[alt][/alt][/img] 2.试剂组成
代号种类组成浓度贮存贮存
R1缓冲液磷酸缓冲液
MgCl[XB]2[/XB]液
去垢剂
0.04mmol/LpH6.9
3mol/L
 
R2酶/辅酶乙酰CoA合成酶
抗坏血酸氧化酶
CoA
ATP
4-AAP
溶于10ml R1液中
≥0.3U/ml
≥1.5U/ml
0.9mmol/L
5.0mmol/L
1.5mmol/L
冷藏5日
R3酶稀释液苯氧乙醇
去垢剂
0.3%(V/V) 
R4 马来酰亚胺
该试剂与R3等体积混合
10.6mmol/L 
R5酶试剂乙酰CoA氧化酶
过氧化物酶
TOOS
混合上述试剂,再等体积R4试剂混合
≥10U/ml
7.5U/ml
0.2mmol/L
冷藏5日
R6标准液 1mmol/L冷藏
*应用带玻塞离心管 3.操作 按图15-8操作。 4.计算 [img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/dongmaizhouyangyinghua/dongmaizhouyangyinghua108.jpg[alt]血清非酯化脂肪酸测定(光度法)操作图[/alt][/img] [img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/dongmaizhouyangyinghua/dongmaizhouyangyinghua109.jpg[alt]血清非酯化脂肪酸测定(光度法)操作图[/alt][/img] 图15-7 血清非酯化脂肪酸测定(光度法)操作图 [img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/dongmaizhouyangyinghua/dongmaizhouyangyinghua110.jpg[alt]血清非脂化脂肪酸测定(酶法)操作图[/alt][/img] 图15-8 血清非脂化脂肪酸测定(酶法)操作图 (胡汉宁 储建中)