一、密度梯度分类法
根据脂蛋白颗粒的大小及其密度分类,即根据在特定的盐密度内的漂浮行为,用超速离心技术可把血浆脂蛋白分成四大族: 乳糜微粒(chylomicron, CM):d<0.95g/ml 极低密度脂蛋白(VLDL):d=0.95~1.006g/ml 低密度脂蛋白(LDL):d=1.006~1.063g/ml 高密度脂蛋白(HDL):d=1.063~1.21g/ml 现在用密度梯度分级分离、亲和层析、电泳等技术与浮选技术联合应用于脂蛋白的分离,发现上述四种脂蛋白还可以分成若干亚族: 中间密度脂蛋白(IDL或LDL[XB]1[/XB]):d=1.006~1.019g/ml 低密度脂蛋白(LDL2):d=1.019~1.063g/ml 高密度脂蛋白也是一种不均一的脂蛋白混合物,用物理方法至少可以再分成两个主要的亚族: HDL[XB]2[/XB]:d=1.063~1125g/ml HDL[XB]3[/XB]:d=1.125~1.210g/ml 另外还有极高密度脂蛋白(VHDL),密度范围为1.210~1.250g/ml。 表2-1 人血浆脂蛋白的种类及一般特性乳糜微粒 | VLDL | LDL[XB]1[/XB] | LDL[XB]2[/XB] | HDL[XB]1[/XB]** | HDL[XB]2[/XB] | HDL[XB]3[/XB] | VHDL | |
漂浮速率 | ||||||||
S[XB]f[/XB](1.063)[SB]*[/SB] | >400 | 20-400 | 12-20 | 0-12 | 0-2 | - | - | - |
S[XB]f[/XB](1.210)[SB]*[/SB] | - | - | - | - | - | 3.6-9.0 | 0-3.5 | - |
平均水合密度(g/ml) | 0.93 | 0.97 | 1.003 | 1.034 | 1.050 | 1.094 | 1.145 | 1.25 |
分子量 | >0.4×10[SB]6[/SB] | 5-10×10[SB]6[/SB] | 3.9-4.8×10[SB]6[/SB] | 2.2-3.0×10[SB]6[/SB] | - | 3.6×10[SB]5[/SB] | 1.75×10[SB]5[/SB] | 1.5×10[SB]6[/SB] |
直径(nm,电镜) | >70.0 | 25.0-70.0 | 22.0-24.0 | 19.6-22.7 | - | 7.0-10.0 | 4.0-7.0 | - |
电泳迁移率 | ||||||||
滤纸、琼脂糖 | 原点 | β | - | 前β[SB]***[/SB] | α | α | ||
聚丙烯酰胺 | 原点 | 前β | β | α | α | |||
蛋白质-脂质比例 | 1-2:98 | 10:90 | 18-20:80 | 20-22:78 | 35-40:60 | 40-45:55 | 55:45 | 65:35 |