十九、抗中性白细胞胞浆自身抗体（Anti－eutrophilcytoplasmic autoantibody ANCA）

Davies 等（1982）首次报告在坏死性肾小球肾炎患者血清中发现ANCA。Hall等（1984）在4例系统性血管炎中也发现ANCA，其中3例表现为坏死性肾小球肾炎。Vander woude等（1985）报告血清中ANCA的滴度与诊断活动性Wegener氏肉芽肿的病情有密切关系，随着病情缓解，ANCA的滴度逐渐降低，所以认为是诊断Wegener氏肉芽肿很敏感的指标。随后一些研究表明检查ANCA对诊断结节　性多动脉炎和特发性新月体肾炎均有较高的敏感性。1989年和1990年分别召开了第一和第二届国际ANCA专题研讨会，引起了国际上的广泛重视。 ANCA抗原存在于中性白细胞的胞浆颗粒中，分子量为29kD，已证实是一种丝氨酸蛋白酶，与存在于中性白细胞嗜天青色颗粒中的丝氨酸蛋白酶-蛋白酶3（PR[XB]3[/XB]）十分相似。所以，胞浆型ANCA（C-ANCA）能与PR[XB]3[/XB]发生特异性反应。另一型称核周型ANCA（P-ANCA）的主要抗原成分是髓过氧化物酶（MPO），在坏死性肾小球肾炎和系统性血管炎患者，约90%的P-ANCA能与MPO发生特异性反应。由于有时P-ANCA同时伴有细胞核荧光，为排除假阳性，必须证明是MPO-ANCA。ANCA可以为IgG、IgM、或IgA类抗体，在不同疾病时三者的出现机率不同。 间接免疫荧光检查ANCA：用肝素抗凝血分离中性白细胞，以0.01mol/l Ph7.4 PBS洗细胞3次，制涂片，吹干。无水酒精固定5min。加待测血清，37℃孵育40min，PBS冲洗。加1：10稀释的抗人IgG-FITC荧光抗体，37℃孵育30min，PBS洗3次，每次3min，磷酸缓冲淮甘油封片。荧光显微镜观察。 ANCA的荧光可表现为C-ANCA和P-ANCA二种类型：C-ANCA荧光在胞浆中，分叶核之间有强的弥散性荧光、核无荧光。P-ANCA的荧光集中核周围，形成环状或不规则块状。 ANCA的致病机理：ANCA能使中性白细胞活化，发生呼吸爆炸，释放胞浆中的多种水解酶，氧自由基等活性物质而导致组织损伤。由于PR[XB]3[/XB]和MPO都带正电荷，它们能与肾小球基底膜结合，PR[XB]3[/XB]-ANCA和MPO-ANCA与之发生免疫反应导致肾小球基底膜损伤，另外，沉积在基底膜上的PR[XB]3[/XB]和MPO还能通过介导细胞免疫，参予肾组织损伤。