七、平滑肌抗体(Smooth muscle antibody , SMA)的检测
Johnson(1965)首次用免疫荧光组织化学间接法在狼疮样肝炎病人血清中发现了SMA,用鼠胃滑肌作抗原。Whitingham用病人自身平滑肌作抗原,证实了SMA的自身免疫性。狼疮性肝炎或慢性活动性肝炎病人血清中SMA的阳性率可达80%以上。Donidht和Whitehouse先后报告了急生病毒性肝炎病人血清中SMA为IgM,而慢性活动性肝炎病人血清中SMA在发病初期(1~4期)为IgM,而后为IgG。Anderson利用纯化肌浆蛋白为抗原与肝炎病人血清中分离的IgM和IgM类SMA进行吸收试验,证明了SMA的特异性。Holborrow Gamel和Renbe先后观察了SMA与鼠肝细胞,肾小球及人的甲状腺上皮细胞和血小板等组织为抗原的免疫荧光染色结果,证明这些组织的抗原性均与平滑肌肌动蛋白有着共同性抗原。
现在多以大白鼠胃壁和肾组织血管壁平滑肌的4~6μm冰冻切片和抗原,附贴在干净的盖玻片上,电扇吹干,放入4[SB]℃[/SB]干燥剂中保存,用前可固定于95%(4[SB]℃[/SB])酒精中1min,或不固定进行间接免疫荧光检测。
染色结果可见胃壁平滑肌,粘膜肌层和肌丝,小血管壁平滑肌等呈现出明亮的黄绿色荧光。有人用荧光检查急性期甲、乙二型肝炎暂时出现SMA的阳性率达80%,稀释血清应在1:10以上的确定为阳性,一般认为,肝细胞表面存在肌动蛋白样物质。慢性活动肝炎患者滴度在1:80以上,急性肝炎患者SMA属IgM类,滴度1:25以上,慢性迁延性肝炎患者SMA也常阳性,滴度1:25左右。使用皮质激素者SMA转阴或滴度降低。健康输血员用原血清或1:5稀释,常有9%~18%的低滴度SMA阳性,似无诊断意义,SMA与性别,年龄无关。
非肝病的SMA阳性者,主要见于传染性单核细胞增生症,类风湿性关节 炎,支原体感染疣,恶性肿瘤(如乳腺癌)。除传染性单核症滴度可达1:320外,一般常≤1:25,其血清与非肌性结构细胞不产生反应。
平滑肌抗体是抗肌球蛋白和肌纤维收缩蛋白的抗体,当肝细胞损害时,释放抗原引起的自身免疫反应。已证实慢性活动性肝炎病人血清中平滑肌抗体是具有特异性的血清学标志,但必须是高效价(1:80)以上,因在人群中常见低效价(1:10~1:20)。临床的研究指出,平滑肌抗体与生化指标改变程度相关,说明高效介平滑肌抗体与肝脏损害有关。Kurki等研究SMA在慢性活动性肝炎等的意义。
Middelton等报告检查了70例肾衰病人自身抗体,肾移植后3个月平滑肌抗体IgM类阳性率占76%,而移植前14%。SLE常是SMA呈阴性结果,可作鉴别诊断参考。