二、探查和发现新的神经递质

免疫细胞化学可作为组织探针(Histological probe ),不断探查和发现新的神经递质。除上述的乙酰胆碱及其合成酶、肾上腺素及其合成酶、活性多肽以外,还可用以确定其它的疑义神经递质(Neurotransmitter chemical suspect)的性质和分布,包括5—HT及其有关酶类、γ—氨基丁酸(GABA)、甘氨酸、天门冬氨酸和牛磺酸等。 近年来,重组DNA工程与免疫细胞相结合而发展起来的原位杂交免疫细胞化学(In situhybridizationImmunocytochemistry)作为组织探针,在发现神经系统特有的蛋白质和肽类方面。具有更高的特异性和灵敏性。重组DNA工程系列用制备的脑的多聚腺苷酸的mRNA,反转录为互补DNa (cDNA),克隆后与组织切片中的mRNA杂交,再按其cDNA核苷酸顺序推断出氨基酸顺序合成新的多肽,以此作为抗原,制备抗血清进行免疫细胞化学的研究,以发现新的神经肽。原位杂交免疫细胞化学技术,简言之,就是利用放射性同位素(或生物素)标记的cDNA片段与组织或细胞中特异的mRNA进行杂交来观察mRNA在体内的分布(详第二十章 )。发展这项技术,对发现神经系统特有的蛋白质或肽类,具有极大的潜力,如脑内特有的mRNA有30000种,目前已知的数10种神经肽仅占其中的一小部分。