六、物理显影液及缓冲液的配制

[b]（一）缓冲液的配制[/b] （1）0.05mol/l pH7.4 TBS 配制 Tris（三羟甲基胺基甲烷）12.1g NaCl 17.5g 加双蒸水1900ml 然后用浓HCL调至pH为7.4再加双蒸水至2000ml Tris 　4.84g NaCl 　17.5g BSA 2.0g NaN[XB]3[/XB][XB][/XB]1.0g 双蒸水1900ml,充分搅拌至溶质完全溶解,用浓HCl调pH至8.2,再加双蒸水至2000ml。 [b]（二）银显影液的配制[/b] 1．乳酸银显影液的配制：混合以下溶液 ①10%阿拉伯胶水溶液60ml ②枸橼酸缓冲液pH 3.5 10ml ③对苯二酚1g,加双蒸水20ml溶解。 ④乳酸银水溶液100 mg加水10ml。 注意在暗处显影。 2．硝酸银显影液的配制 ①10%阿拉伯胶水溶液60ml。枸橼酸缓冲液ph 3.5 10ml ②对苯二酸1.7g水溶液30ml。 ③硝酸银40mg水溶液2ml。 ①②两溶液完全溶解，临用前加入硝酸银溶液。在暗处显影。 4．彩色显影液的配制 ①0.2N氢氧化钠的异丙醇溶液5ml溶入100mgα-萘酚（或菲尼酮）。 ②500mg碳酸钠，25mg溴化钾，50mg亚硫酸钠，加双蒸水25ml。 ①②两液1：10混合，室温下彩色显影。 5．醋酸银显影液 ①15%阿拉伯胶60ml，柠檬酸缓冲液10ml，pH3.5。 ②对苯二酚1.7g溶于20ml蒸馏水中。 ③醋酸银100mg溶于蒸馏水10ml中。 用前①②③依次混合，不需要避光，在室温下显影。 [b]（三）柠檬酸缓冲液的配制[/b] 柠檬酸（C[XB]6[/XB]H[XB]8[/XB]O[XB]7[/XB].H[XB]2[/XB]O）25.5g 柠檬酸三钠（Na[XB]3[/XB]C[XB]6[/XB]H[XB]5[/XB]O[XB]7[/XB].2H[XB]2[/XB]O）23.5g 加重蒸水100ml溶解即成，pH3.5 (四)氢氧化钠（NaOH）无水乙醇饱和溶液的配制 8g氢氧化钠，加入100ml无水乙醇振摇溶解即成。