(二)四乙基罗达明(tetraethylrodamineB200, RB200)
呈褐红色粉末,不溶于水,易溶于酒精和丙酮,性质稳定,可长期保存。最大吸收光谱为570nm,最大发射光谱为595~600nm,呈明亮橙红色荧光。分子量为580(图3-7)。
RB200在五氯化磷(PCl5)作用下转变成磺酰氯(SO2Cl),在碱性条件下易与蛋白质的赖氨酸ε-氨基反应结合而标记在蛋白分子上。化学反应式如下(图3-8)。
[img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/shiyongmianyixibaoyuhesuan/shiyongmianyixibaoyuhesuan010.jpg[alt]B200在可见光区的吸收 [/alt][/img]
图3-7 RB200在可见光区的吸收
[img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/shiyongmianyixibaoyuhesuan/shiyongmianyixibaoyuhesuan011.jpg[alt] RB200标记抗体反应[/alt][/img]
图3-8 RB200标记抗体反应光谱和荧光光谱