胃切除标本幽门螺杆菌与弯曲菌样细菌观察
近年来国内外许多学者认为幽门螺杆菌(简称Hp)和弯曲菌样细菌(简称CLOs)与胃炎和消化性溃疡的发病密切相关。为观察上述关系,我室1987-03-02自本校两所附属医院收集因胃十二指肠溃疡和胃癌施行胃切除手术标本84份,进行上述两类细菌的检测。 [b]1 对象和方法[/b] 1.1 对象 全组84例,男76例,女8例;年龄29岁~68岁;病程1月~38a。手术切除标本均经病理证实,胃溃疡27例,18例并胃粘膜慢性炎症;十二指肠溃疡17例,11例并胃粘膜慢性炎症;复合溃疡8例,3例并慢性胃炎;胃体癌25例,4例并慢胃炎;贲门癌7例。32例术前使用过不同种类的抗菌药物:青、链、庆、卡、灭滴灵及痢特灵。无菌,剪取手术切下的胃大部组织中的胃体、胃窦及十二指肠球部粘膜各一块,约1cm×1cm~1.5cm,pH7.4的PBC缓冲液1ml~2ml输送瓶内,微氧条件下,1h内送实验室检查,胃腔pH值采用pH试纸法测定。 1.2 方法 直接涂片镜检:将胃体、窦及十二指肠球部膜分别剪成碎块置pH7.4组织匀浆器中研磨成浆,取少量该匀浆涂布在载玻片上,固定,革兰染色,镜检,见革兰阴性呈螺旋状或呈海鸥状细菌为镜检阳性,反之为阴性。 分离培养:在制备直接涂片的同时,取上述组织匀浆0.5ml,接种在Skirrow选择培养基上(含万古霉素10ml/L,多粘菌素B250IU/L,TMP5ml/L),置微氧环境(O[XB]22.2[/XB][XB]%[/XB],N[XB]2[/XB]87.8%,CO[XB]2[/XB]10%)。35℃~37℃培养48h~72h后分离,无生长者继续培养2d~3d再分离,培养1周仍无生长者为培养阴性。据其在微氧环境,Skirrow培养基生长而在厌氧、需氧环境均不生长的特点,及典型细菌形态和生化反应结果作出初步判断。最后鉴定尿素酶(-)者为CLOS,尿素酶(+)为Hp(尿素酶试验以试管法为准)。 [b]2 结果[/b] 2.1 细菌检出情况见表1,2,3。胃粘膜表面pH值范围2~9。 表1 Hp/CLOs-2在消化性溃疡和胃癌中的检出率病名 | 直接涂片镜检阳性率(检出数/例) | 细菌培养阳性率(检出数/率) |
消化性溃疡 | 88.5(46/52) | 82.9(29/35) |
胃溃疡 | 88.9(24/27) | 88.2(15/17) |
十二指肠溃疡 | 94.1(16/17) | 81.8(9/11) |
复合溃疡 | 75.0(6/8) | 71.4(5/7) |
胃癌 | 68.8(22/32) | 57.1(12/21) |
胃体癌 | 72.0(18/25) | 64.7(11/17) |
贲门癌 | 57.1(4/7) | 25.0(1/4) |
病 名 | Hp | CLO[XB]s-2[/XB] | Hp+CLO[XB]s-2[/XB] |
胃溃疡 | 7 | 4 | 5 |
十二指肠溃疡 | 8 | 1 | |
复合溃疡 | 3 | 2 | |
胃体癌 | 6 | 3 | 2 |
贲门癌 | 1 | ||
合 计 | 25 | 9 | 8 |
胃体 | 胃窦 | 球部 | |
涂片阳性率(%) | 69.1 (58/84) | 71.65 (58/81) | 5.6 (40/72) |
培养阳性率(%) | |||
CLOs-2 | 25.0 (10/40) | 12.5 (5/40) | 13.9 (5/36) |
Hp | 57.5 (23/40) | 67.5 (27/40) | 50.0 (18/36) |