7 关于诊断方法

检出Hp最可靠的细菌学方法是Warthin-Starry银染色法。此法不但Hp染得好，且易与污染菌及组织碎片鉴别。要提高检出阳性率，新西兰学者的经验是：①至少取4块活检标本，因为即便在同一部位，Hp可能呈斑块状不均匀分布；②组织学检查与微生物培养各送2块；③用加血的巧克力培养基；④涂片检查效果不好，用印片检查，阳性率可提高20%；⑤培养基平板至少应放置1周，因Hp生长缓慢。 改良的Giemsa染色法（即不用鉴别染色）快速简便，与银染色法同样可靠。经福尔马林固定、石蜡包埋的胃活检切片中的Hp，可用吖啶橙染色法来鉴定。此法操作简单，Hp好辨认，对我国Hp的研究有实用价值。 快速诊断法适应胃镜检查的需要。其基本原理是Hp具有极强的尿素酶活力，能分解尿素为氨及二氧化碳，氨可用多种方法检出。在用Christensen尿素液作基质时，如有氨释出，溶液从棕色变为粉红色。有人检查了112块活检组织，证实此法与组织培养法极为吻合，组织培养阳性的66例中，尿素酶试验60例阳性；培养阴性的46例中，尿素酶试验45例阴性；且显色速度和颜色深度与标本中的细菌数大致平行。现应用专用的尿素液，可缩短反应时间，且尿素酶活力的对数与银染色法检出Hp间直接相关，尿素酶阳性的程度又与炎症细胞浸润程度相关。澳大利亚Dalta West公司提供了一种称之为CLO test的微皿，内盛尿素琼脂及指示剂，用前预热至30°C，然后将镜检时取得的活组织块置入其中，阳性时活组织周围呈红/粉红色，阴性时原黄色不变，只需10min即可出结果。对205例胃镜检病人所作的前瞻性研究证实此法简便、准确、可靠。 最近有人报告了一种快速非侵入性Hp诊断法—[SB]13[/SB]C尿素呼吸试验，有Hp感染者，在口服[SB]13[/SB]C—尿素后20min，[SB]13[/SB]CO[XB]2[/XB]即出现于呼出气体中，在100min内以恒定的比例累增；无感染者则无[SB]13[/SB]CO[XB]2[/XB]呼出。此法安全，可重复，可用于流行病学调查及观察治疗反应，但设备条件要求高。 但是，不论采用何种方法，都可能有假阴性，其原因是多方面的。胃镜检查时可造成假阴性的原因是：咽下了利多卡因或服过二甲基硅油（去泡剂）；活检钳沾上了戉二醛（电镜检查标本之固定剂）；或所取为肠腺化生上皮。服用过铋剂、抗生素，胃内有甲氰脒胍或呋喃硝胺，也都可造成假阴性。 有关Hp感染后免疫学的研究，近两年来甚为活跃。如31例Hp培养阳性的病人，100%补体结合反应阳性，87%细菌凝集反应阳性；Hp的存在、抗体的检出与组织学证实的胃炎三者间有极密切联系。用酶联免疫法发现，Hp阳性的NUD病人血清中IgG抗体（全身免疫保卫系统中的主要抗体）、IgA抗体（浆膜粘液分泌的主要局部抗体）均明显增高，尤以前者为著。不过，这些病人抗其他弯曲菌（空肠、痰、粪、胚胎弯曲菌）的抗体滴度也升高，说明抗原有交叉反应。进一步用免疫氧化酶技术证实胃炎粘膜切片中的Hp 被IgG、IgA、和IgM所覆盖，但它们并未能清除Hp，处于胃小窝深处的Hp则不被覆盖，说明Hp在此处受到保护。 最近报告用免疫吸附（immunoblotting）发现十二指肠溃疡病人的血清对Hp有特异性免疫反应，这种特异性抗体，儿童低于实验室工作人员，后者又低于溃疡病人，三组之间并无重叠现象。Hp阳性病人接受铋剂或抗生素治疗后用被动血凝法测出的抗体滴度，随着治疗好转而下降。 19世纪末期就已发现溃疡病人胃组织中有细菌存在。从Marshall等开始的有关Hp的研究，可能将使胃炎（消化性溃疡？）的病因学和治疗学方面的研究有重大突破。我国慢性胃炎的发病率很高；我们在用痢特灵等治疗溃疡病方面已经开始了很有意义的工作，也许这些都和Hp研究有密切关系。我们可以从下述几方面着手工作：①学习有关Hp的基本知识，检查方法和研究进展；②组织起来，对过去胃镜检查的大量病例，有计划地作回顾性研究，摸清基本情况，随访不同条件的群、组的发展与转归；③摸索动物模型的问题；④开展前瞻性、双盲对照治疗研究，选择对胃炎、溃疡无作用而为Hp敏感的药物，包括中药，进行试验，观察清除Hp对炎症、溃疡的影响（包括愈合、复发等方面）；⑤采用精确分析方法，研究Hp感染后机体某些重要成分的改变与Hp致病物质；⑥利用过去胃镜普查资料，作我国Hp流行病学研究；⑦注意Hp与其他常见病（如胃癌）的关系，等等。可能将是一个十分广阔的新领域。 （本文系作者在澳大利亚悉尼大学及皇家北岸医院内科进修时完成，曾得到Piper教授的热情指导和澳中理事会的支持，谨致谢意）。