（一）MHC对免疫应答遗传控制研究的基本条件

1.人工合成多肽抗原 化学合成多肽抗原主要有以下两类： （1）合成分枝多肽抗原：它是以线状的多聚赖氨酸（L）联上多聚丙氨酸（A）的侧链，形成A-L骨架结构，然后再在丙氨酸链上偶联不同的氨基酸，形成具有不同抗原特异性的分枝多肽抗原。最常用的是（T，G）-A-L，（H，G）-A-L和（φ，G）-A-L等（图6-14）。抗原特异性由末端氨基酸所决定，侧枝和主干起载体的作用。 [img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/xibaohefenzimianyixue/xibaohefenzimianyixue066.jpg[alt]MHC与胸腺的选择作用[/alt][/img] 图6-13　MHC与胸腺的选择作用 （2）线状多肽抗原：这是几种氨基酸按不同比例和数量结合而成的线状多肽，具有较强的抗原性，如GLφ等。单种氨基酸组成的均一多肽抗原性很弱，但偶联上半抗原后则是很好的免疫原，例如多聚赖氨酸（PLL）与DNP偶联形成的DNP-PLL被广泛用于豚鼠免疫应答遗传控制的研究。 2.同类系小鼠（congenic mice）是遗传北景完合相同，只是所需研究的那个基因不同的小鼠。建立同类系小鼠是诺贝尔获得者Snell对免疫遗传学作用出的突出贡献。有了同类系小鼠和人工合成多肽抗原，就可以深入研究免疫应答的基因控制以及与MHC的关系。同类系小鼠的培育的方法见图6-15。 首先近交系（inbredstrain）A品系小鼠与另一个近交系B品系小鼠进行交配，A品系MHC是a/a纯合（homozygous）的，B品系MHC是b/b纯合的。A与B品系杂交的子一代（F1）全部是a/b杂合状态的。然后将F1小鼠与亲本A品系进行回交（backcross），其子代一半为a/a，另一半为a/b,a/b杂合状态小鼠的皮片移植到A品系小鼠后迅速被排斥，而a/a子代小鼠的皮片移植到A品系小鼠后并不迅速被排斥。将通过皮片移植后发生迅速排所鉴定的a/b杂合小鼠又与A品系小鼠进行回交，其子代一半为a/a，另一半为a/b，再用上述皮片移植排斥反应的方法鉴定出a/a或a/b，将a/b杂合不再与A品系小鼠进行回交。如此继续20代后，a/b杂合小b等位基因仍然保留，但原来B品系小鼠中其它的遗传座位都消失了，正如连续稀释（serial dilution）一样，F1小鼠保留了B品系基因的50%，回交后第一代平均只保留了B品系基因的25%，这样经过20次回交后除了保留B品系的MHC等位基因（b）以外，其余B品系的基因（非MHC基因）都消失。也就是说，经过如此20代回交后a/b小鼠，除了第17号染色体上的MHC是a/b杂合以外，其余的遗传背景（除17号染色体MHC以外和其余39对染色体）均与A品系相同。将经过20代回交的a/b小鼠进行品种间杂交（interbreed）或称史妹交配，其子代的MHC基因25%是a/a纯合，25%是b/b纯合，50%是a/b杂合的。其中b/b纯合小鼠皮片移植的A品系小鼠后即发生迅速的排斥。用b/b纯合小鼠进行品种间杂交，培育出一个新的品系即MHC基因位点上与B品系相同，而其它所有的遗传背景与A品系相同，我们可称作这个品系小鼠与A品系是同类系（congenic to strain A）,或者叫做在A遗传背景的B MHC。常用同类系小鼠单体型见表6-7。 [img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/xibaohefenzimianyixue/xibaohefenzimianyixue067.jpg[alt]合成分枝多肽抗原示意[/alt][/img] 图6-14　合成分枝多肽抗原示意 注：（T，G）-A--L：（多聚酪氨酸，多聚谷氨酸）-多聚丙氨酸-多聚赖氨酸 （H，G）-A--L：（多聚酪氨酸，多聚谷氨酸）-多聚丙氨酸-多聚赖氨酸 （φ，G）-A--L：（多聚酪氨酸，多聚谷氨酸）-多聚丙氨酸-多聚赖氨酸 L：L型，D：D型 3.H-2内重组株　通过不同的同类系杂交，根据交换重组定律，在杂交后代中选择新的H-2内重组体（interH-2recombinants）。不同的重组株在H-2内的一些基因位点具有不同的等位基因，即H-2单体型（haplotype）不同。 例如品系A，B10.A单体型为a，它是由H-2k和H-2d两个双亲单体型的I-E亚区和S区之间发生交换重组而产生（表6-8）。H-2内重组株（举例）参见表6-9。 表6-7　常用同类系小鼠的单体型（标准品系，type strains）

品系	单体型	K	I-A	S	D
B10(C57BL/10)	H-2[SB]b[/SB]	b	b	b	b
B57BL/6	H-2[SB]b[/SB]	b	b	b	b
DBA/2	H-2[SB]d[/SB]	d	d	d	d
Balb/c	H-2[SB]d[/SB]	d	d	d	d
B10.D2	H-2[SB]d[/SB]	d	d	d	d
C3H	H-2[SB]k[/SB]	k	k	k	k
CBA	H-2[SB]k[/SB]	k	k	k	k
B10.BR	H-2[SB]k[/SB]	k	k	k	k

[img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/xibaohefenzimianyixue/xibaohefenzimianyixue068.jpg[alt]同类系小鼠培育的方法[/alt][/img] 图6-15　同类系小鼠培育的方法 表6-8　A.B10.AH-2内重组株的产生

单体型		K	I-A	I-E	S	G	D
亲代1	k	k	k	k	k	k	k
亲代2	d	d	d	d	d	d	d
A.B10·A	a	k	k	k	d	d	d

表6-9 H-2内重组株（举例）

品系	单体型	双亲单体型	K	I区		S	G	D
				A	E
A.B10.A	a	k/d	k	k	k	d	d	d
A.AL	a1	k/d	k	k	k	k	k	d
C3H.OL	o1	d/k	d	d	d	k	k	k
C3H.OH	o2	d/k	d	d	d	d	d	k
B10.A(4R)	h4	a/b	k	k	b	b	b	b
B10.AM	h5	k/b	k	k	k	k	k	b
B10.A(3R)	i3	b/a	b	b	k	d	d	d
B10.A(5R)	i5	b/a	b	b	k	d	d	d
A.TL	t1	s/al	s	k	k	k	k	d
A.Th,B10.S(7R)	t2	s/a	s	s	s	s	s	d
BSVS	ts	s/a2	s	s	s	d	d	d
B10.M(17R)	ag1	s/f	k	k	k	d	d	f
B10.M(11R)	ap1	s/f	f	f	f	f	f	d