二、比色分析的测量方法
无论是光电比色计还是分光亮度计,最常用的测量方法有如下两种。
[b](一)标准曲线计[/b]
先配制一系列不同浓度的标准溶液,用选定的显色剂显色。选用合适波长的入射光(光电比色计用滤光片,分光亮度计可转动波长调节器)。测定时先以空白溶液调节透光率100%,然后分别测定标准系列的吸亮度。以吸亮度为纵坐标,浓度为横坐标作图得到一条通过原点的直线,叫做标准曲线(或称工作曲线)。
例如,测定维生素B12时,可预先绘制维生素B12的A-c标准曲线(图8-11),再用完全相同的方法和步骤测定被测溶液的吸亮度,即可从标准曲线上找出被测溶液的浓度或含量。
这种方法叫做标准蛐线法。标准曲线可在固定仪器和方法的条件下多次使用,适合于经常性工作。但若仪器不同或测定方法及条件改变,测得的标准曲线不同。因此在更换任何测定条件时都需重新绘制标准曲线。
[img]https://baike.zhuayao.net/Uploads/zyzy/lilunshuji/yiyonghuaxue/yiyonghuaxue300.jpg[alt]维生素B12的标准曲线[/alt][/img]
图8-11 维生素B[XB]12[/XB]的标准曲线
[b](二)直接比较计算法[/b]
若仅对个别样品进行测定,且A-c曲线线性良好,可水作标准曲线而直接比较测定结果。
先配制一个被测物质溶液浓度相近的标准溶液,与被测溶液在相同条件下测定吸光度。根据下式可以计算。
A[XB]标[/XB]=K[XB]标[/XB]c[XB]标[/XB]b[XB]标[/XB]
A[XB]测[/XB]=K[XB]测[/XB]c[XB]测[/XB]b[XB]测[/XB]
由于使用同一波长的入射光,采用同样的比色皿,测定同样的物质。所以
K[XB]标[/XB]=K[XB]测[/XB]
b[XB]标[/XB]=b[XB]测[/XB]
因此A[XB]标[/XB]/A[XB]测[/XB]=c[XB]标[/XB]/c[XB]测[/XB]
则c[XB]测[/XB]=A[XB]测[/XB]/A[XB]标[/XB]×c[XB]标[/XB]